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      利用離心機處理與測定血漿樣品

      發(fā)布時間:

      2014-04-02


      概要:

      離心時轉(zhuǎn)速我們一般就用16000rpm的,效果不錯啊,轉(zhuǎn)速的影響沒有考察過,但是離心機轉(zhuǎn)速較高時比較容易發(fā)熱,如果你的藥熱不穩(wěn)定的話要注意;

      取血漿200μl , 加10 %高氯酸溶液100μl ,漩渦混勻,10 000 r·min - 1離心5 min ,取上清液100μl ,加入NaOH 溶液50μl , 漩渦混勻30 s 后, 加入衍生化試液OPA100μl ,漩渦混勻,置暗處放置10 min ,吸取20μl 進樣, 按上述條件測定,記錄色譜圖和GSH 衍生物峰面積A。

      處理方法
      1,200,100μl一般用移液槍比較方便,國產(chǎn)的還是進口的你可以根據(jù)實驗要求和經(jīng)費情況自己選擇

      2,我們做血漿樣本時10 %高氯酸溶液蛋白沉淀,然后要調(diào)pH值的,當然你可以試驗一下加入NaOH的量,以后不用每管都調(diào)pH的,加固定量就好

      3,離心時轉(zhuǎn)速我們一般就用16000rpm的,效果不錯啊,轉(zhuǎn)速的影響沒有考察過,但是離心機轉(zhuǎn)速較高時比較容易發(fā)熱,如果你的藥熱不穩(wěn)定的話要注意;

      4,NaOH 溶液濃度和用量第2點已經(jīng)說了

      5,加入衍生化溶液后,要暗處放置應(yīng)該是因為這個衍生化試劑或衍生化反應(yīng)發(fā)生的條件需要避光,這個試劑應(yīng)該比較成熟了

      另外,空白血漿應(yīng)該不是指不加衍生化試劑,而是除了不加藥物,其他試劑和處理方法都和含藥血漿一樣,加衍生化試劑可以知道衍生化試劑對樣品峰有沒有干擾。

      關(guān)鍵詞:


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